Tinción de Gram
La tinción de Gram, también conocida como
coloración de Gram, es una técnica de laboratorio que se utiliza rutinariamente
en los estudios microbiológicos de las bacterias. Fue diseñada por
Christian Gram, un científico danés, en el año 1884. El objetivo de Gram era
conseguir una prueba con la que fuera posible diferenciar diferentes grupos de
bacterias para así poder estudiarlas y clasificarlas. La prueba resultó todo un
éxito y pronto se convirtió en una técnica muy útil no solo para el estudio de
las bacterias, sino también para poder identificarlas rápidamente en una
infección y seleccionar el antibiótico más adecuado para tratarla.
La técnica se basa en aplicar una serie de
colorantes a una muestra de cualquier origen (esputo, orina, pus, etcétera) que supuestamente contenga
bacterias no identificadas. Los colorantes tiñen la pared de las bacterias de
color morado y, tras unos minutos, se realiza un lavado del colorante. Después
de eso puede que el colorante permanezca en la pared bacteriana o que se haya
ido. En el primer caso permanecería el color morado, y se trataría de bacterias
Gram positivas y, en el segundo, la pared tendría un color rosado, y
serían Gram negativas.
La tinción de Gram también tiene ciertas
limitaciones. Algunas bacterias no tienen pared, como por ejemplo las Chlamidias,
y no se podrán identificar, al igual que los virus. En esos casos la tinción no
coloreará ningún germen. Otro aspecto negativo de la prueba es que no puede
identificar el tipo exacto de bacteria responsable de la infección. Para ello
es necesario realizar un cultivo microbiológico que se acompaña siempre de un
antibiograma para estudiar de forma exacta el antibiótico más efectivo.
Cómo se hace una tinción de Gram
La tinción de Gram se realiza en el laboratorio, y tú no serás consciente de ninguno de los pasos de la técnica. Para que los conozcas los resumimos a continuación:
- Se extiende la muestra recogida (que suele ser líquida o viscosa) en un porta de cristal, y se deja secar al aire.
- Se aplica metanol al porta; así, las bacterias quedan pegadas en la superficie.
- Se añade violeta de genciana, un colorante que tiñe todas las bacterias de color púrpura. Se debe dejar durante un minuto para que haga efecto.
- Se lava la muestra coloreada con agua y se añade alcohol-acetona para desteñir las bacterias que se deben teñir con el violeta de genciana. Es la parte más importante de la prueba, ya que si se deja demasiado tiempo se desteñirían todas las bacterias. Después se lava de nuevo con agua para eliminar el alcohol.
- Se añade fucsina, otro colorante que tiñe de rosa las bacterias que no se han teñido de color púrpura. Así se pueden observar al microscopio, aunque serán gramnegativas.
- El microbiólogo estudia la muestra con un microscopio e identifica bacterias teñidas.
Observamos:
Bacterias Gram Positivas y Gram Negativas



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